1.實驗目的:
通過細胞的體外培養來檢測(cè)産(chǎn)品的生物性能是否達到要求。
2.實驗原理:
體外培養的細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,並(bìng)維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層彙合以後,由於(yú)密度過大生存空間不足而引起營養枯竭,将培養的細胞分散,從容器中取出,以1:2或l:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養,即爲傳代培養。通過貼壁細胞的傳代培養,觀察細胞的生長狀态可以反映出培養産品是否達到細胞培養的要求。
3.實驗材料:
3.1 抽檢樣品:

3.2 細胞株:VERO細胞系:*貼(tiē)壁細胞,主要用於(yú)接種病毒的一種細胞。
3.3 實驗試劑:RPMI1640(8111031)、0.25%胰酶(876536)、小牛血清(8187648)、都購(gòu)自廣州英韋創(chuàng)津生物試劑公司。
3.4 實驗耗材:3ml的巴斯德吸管、酒精燈(dēng)、鑷(niè)子、酒精棉球。
3.5 實驗儀器:XDS-1倒置顯微鏡購(gòu)自廣(guǎng)州粵顯光學儀器科技有限公司;
超淨工作台購(gòu)自蘇州淨化儀器設備(bèi)公司;
4.實驗步驟:
4.1. 在倒置顯微鏡下觀察細胞形态和密度,取生長(zhǎng)良好的細胞若幹(gàn)瓶,棄掉舊培養液。
4.2. 加入胰酶消化細(xì)胞,消化适度後(hòu)倒去胰酶。
4.3. 加入适量培養液反複(fù)吹打數(shù)次。
4.4. 細胞計數稀釋細胞密度爲1×105/ml
4.5. 将細胞接種於(yú)抽檢(jiǎn)樣品中:

5.實驗結果:
1、Vero細胞培養24小時(shí)後(hòu)10×10倍下圖片

2、Vero細胞培養48小時(shí)後(hòu)10×10倍下圖片

3、細胞計數

6.結果判定
這次抽檢樣品做細胞培養檢測(cè),細胞生長(zhǎng)狀态正常,貼壁生長(zhǎng)良好,10%血清培養液培養,細胞增長(zhǎng)率符合企業标準。